利用50ml超濾杯UFSC05001進行樣品處理,需遵循規(guī)范的操作流程,其核心步驟包括準備、組裝、運行、回收與維護。以下是基于其標準操作方法的關鍵環(huán)節(jié)。 一、處理前準備
充分的準備是確保處理效率和樣品安全的基礎。
樣品預處理:將待處理樣品預先要進行離心或過濾,以去除不溶性顆粒、細胞碎片或可能堵塞膜的大聚集物。調整樣品至與后續(xù)緩沖液或目標緩沖條件兼容的pH與離子強度。
緩沖液準備:準備好用于樣品濃縮后沖洗、或用于緩沖液交換的目標緩沖液。所有溶液建議預先冷卻或置于適宜溫度。
裝置檢查:檢查50ml超濾杯UFSC05001各組件是否潔凈、完好。確保磁力攪拌子已放入杯內。
二、裝置組裝與平衡
正確組裝是保證密封和功能正常的關鍵。
安裝超濾膜:從儲存液中取出所需截留分子量的超濾膜,按照制造商指引將其放置在膜支撐板的正確位置,確保膜平整無褶皺。通常濕潤的膜會隨密封圈一同被杯體與支撐板夾緊密封。注意操作輕柔,避免損傷膜表面。
連接與固定:將裝有膜的支撐板組件與濾液收集管連接,再將杯體旋緊于其上,確保密封。蓋上帶有進氣口和排氣/取樣口的杯蓋,并連接至壓力源。
三、樣品處理運行
運行過程需控制壓力、攪拌并監(jiān)測進度。
加樣與初始操作:將預處理后的樣品倒入50ml超濾杯UFSC05001。開啟磁力攪拌器,設定適當?shù)霓D速,使攪拌子平穩(wěn)旋轉,確保樣品在膜表面形成均勻的切向流。初始時不宜施加過高壓力。
壓力驅動過濾:緩慢調節(jié)進氣閥,施加較低壓力開始過濾。觀察濾液流出情況。待系統(tǒng)穩(wěn)定后,可逐步將壓力調整至推薦范圍。在整個過程中,壓力應保持穩(wěn)定,避免劇烈波動。切向流設計有助于減少濃差極化和膜污染。
過程監(jiān)控:通過杯體上的刻度或定時取出稱量,監(jiān)控樣品體積的減少。當體積接近目標濃縮體積時,需提前降低壓力或準備終止。若進行緩沖液置換,需在樣品濃縮至較小體積后,加入置換液至原體積,重復濃縮步驟。此“稀釋-濃縮”循環(huán)通常需進行數(shù)次以達到充分置換。
收集濾液:濾液收集于下方的收集管中,可用于分析透過的小分子或作為廢液處理。
四、樣品回收與裝置拆卸
處理完成后,需安全、回收目標樣品。
終止與壓力釋放:先緩慢關閉進氣閥,釋放系統(tǒng)內壓力。待壓力表歸零后,再拆卸進氣連接。
回收截留液:小心打開杯蓋。截留液即為濃縮或置換后的目標樣品。可用移液器從杯內吸取。為更大化回收,可用少量置換液或保存液沖洗杯內壁及膜表面,合并沖洗液。
拆卸與初步處理:旋開杯體,小心取出超濾膜組件。立即對膜、杯體、密封圈等進行清洗或后續(xù)處理。
五、后續(xù)清洗與保存
即時清洗:使用后應立即用去離子水或指定清洗液沖洗所有接觸樣品的部件,特別是超濾膜,以去除殘留物,防止干涸堵塞。
膜保存:根據(jù)膜材質,按制造商建議進行保存。
設備干燥與存放:將所有清洗后的部件干燥,存放于潔凈處。
關鍵注意事項:始終在推薦壓力范圍內操作。選擇膜的截留分子量應低于目標保留分子的大小。處理過程中保持低溫有助于保護熱敏性樣品生物活性。確保所有操作步驟遵循生物安全規(guī)范,特別是處理潛在傳染性樣品時。